Méthode pour doser la pullulanase/limit dextrinase

Le test PullG6 pour la mesure de la pullulanase utilise un substrat soluble dans l'eau, à savoir le 4,6-O-benzylidène-4-nitrophényl-63-α-D-maltotriosyl-maltotriose (BPNPG3G3), couplé aux enzymes auxiliaires α-glucosidase et β-glucosidase.

Après hydrolyse du substrat à1,6-α par pullulanase ou limit-dextrinase, le 4-nitrophényl-β-maltotrioside libéré est immédiatement hydrolysé au glucose et au 4-nitrophénol par l'action concertée de l'α-glucosidase et β-glucosidase dans le mélange réactif.

La réaction est terminée et les ions phénolate sont développés par addition d'alkali dilué.

L'absorbance est lue à 400 nm et la valeur obtenue correspond directement à l'activité pullulanase.

Note : PNP = 4-nitrophenol

Température de livraison : ambiante

Température de stockage :
- Stabilité à court terme: 2-8°C
- Stabilité à long terme: voir les étiquettes de chaque composant

Format de dosage : spectrophotomètre

Méthode de détection : absorbance - 400 

Réponse du signal : croissance

Temps de réaction : 10 min pour les préparations à la pullanase / 30 min pour les extraits de malt contenant de la Limit-dextrinase

Limite de détection : 0,18 U/ml pour les préparations pullulanase (dilution de 50 fois) / 0,01 U/g pour la limit dextrinase dans le malt moulu

Reproductibilité (%) : ~ 3%

Stabilité : > 2 ans dans les conditions de stockage recommandées

Nouvelle méthode

• Haute sensibilité
• Méthode de référence car la structure du substrat est définie
• Stable + de 1 an après préparation des réactifs
• Adaptable en manuel et automate
• 1 contrôle inclus dans le kit
• Reproductible
• Pas de problématique de transglycosilation
• Pas de changement, variation entre les lots

Dosage des préparations de la pullulanase microbienne et mesure de la limit dextrinase dans les extraits de malt

Notice technique Fiche de sécurité Fiche de calcul Rapport de validation

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